Mauruuru koe mo te toro www.chinacdoe.com.Ko te putanga pūtirotiro e whakamahia ana e koe he iti te tautoko CSS.Mo te wheako pai rawa atu, e taunaki ana matou me whakamahi koe i tetahi kaitirotiro kua whakahoutia (me monohia ranei te Aratau Hototahi ki Internet Explorer).I tenei wa, hei whakarite i te tautoko tonu, ka tukuna e matou te waahi kaore he momo me te JavaScript.
Ko nga punaha Lab-on-a-chip me nga kaha i runga i te waahi e tuku ana i te kaha mo te taatai tere me te tika me te whai hua i roto i nga waahi e herea ana nga rauemi kaore i te waatea nga taputapu rongoa koiora me nga tohunga kua whakangungua.Heoi, ko te hanga i tetahi punaha whakamatautau mo te tiaki i te wa kotahi kei a ia nga ahuatanga katoa e tika ana mo te tohatoha maha-mahi, te tuku i runga i te tono, te mahi pono, me te rokiroki mo te wa roa o nga reagents he wero nui tonu.I konei ka whakaahuahia e matou he hangarau whakaneke haere moroiti ka taea te raweke i nga wē i tetahi huarahi, te whakautu tika me te riterite ki te pehanga hau, me te mau tonu ki nga nekehanga ohorere me nga wiri.I runga i te hangarau, ka whakaahua ano matou i te whanaketanga o te punaha tauhohenga mekameka polymerase e whakauru ana i te whakaurunga reagent, te whakaranu me nga mahi tauhohenga katoa i roto i te mahi kotahi, e whakatutuki ana i nga mahi "tauira-i-whakautu-waho" mo nga tauira nasal haumanu katoa mai i nga turoro 18 me Rewharewha me te 18 mana takitahi, i roto i te pai o te whakakotahitanga o te kaha rewharewha me te tauhohenga mekameka polymerase (pearson coefficients > 0.9).I runga i te hangarau, ka whakaahua ano matou i te whanaketanga o te punaha tauhohenga mekameka polymerase e whakauru ana i te whakaurunga reagent, te whakaranu me nga mahi tauhohenga katoa i roto i te mahi kotahi, e whakatutuki ana i nga mahi "tauira-i-whakautu-waho" mo nga tauira nasal haumanu katoa mai i nga turoro 18. me te rewharewha me te 18 nga mana takitahi, i roto i te pai o te whakakotahitanga o te kaha rewharewha me te tauhohenga mekameka polymerase paerewa (Pearson coefficients > 0.9).Основываясь на этой технологии, мы также описываем разработку системы полимеразной цепной реакции, которая объединяет функции введения реагентов, смешивания и реакции в одном процессе, что обеспечивает выполнение «образец-в-ответ-выход» для всех клинических образцов из носа от 18 пациентов с Грипп и 18 отдельных контролей, в хорошем соответствии интенсивности флуоресреценции со стандартной полимейпноицефит Пирсона> 0,9).I runga i tenei hangarau, ka whakaahua ano matou i te whanaketanga o te punaha tauhohenga mekameka polymerase e whakakotahi ana i nga mahi o te werohanga, te whakaranu, me te tauhohenga i roto i te mahi kotahi, e taea ai te tauira-i-whakautu-waho mo nga tauira nasal haumanu katoa mai i nga turoro rewharewha 18.me te 18 nga mana takitahi, e pai ana ki te tauhohenga polymerase chain tauhohenga korikori kaha (nga whakarea o Pearson > 0.9).I runga i tenei hangarau, ka whakaahua ano matou i te whanaketanga o te punaha tauhohenga mekameka polymerase e whakauru ana i te werohanga reagent, te whakaranu, me nga mahi tauhohenga ki te tātari i nga tauira ihu haumanu katoa mai i nga tauira 18 i roto-tauira i nga tauira turoro nasal.Ko te rewharewha me te 18 nga mana takitahi, ka rite te kaha o te rewharewha. pai ki te tauhohenga mekameka polymerase paerewa (te whakarea o Pearson > 0.9).Ko te tüäpapa e whakaarohia ana ka whakapumau i te aunoatanga pono o te tātari biomedical, na reira ka tere ake te hokohoko o nga momo taputapu whakamatautau mo te tiaki.
Ko nga mate o te tangata ka puta ake, penei i te mate urutaru 2020 COVID-19 kua mate i nga miriona taangata, he tino whakatuma ki te hauora o te ao me te ao tangata1.He mea nui te kite wawe, tere me te tika o nga mate ki te whakahaere i te horapa o te huaketo me te whakapai ake i nga putanga maimoatanga.He rauwiringa kaiao tātaritanga matua e ahu mai ana i nga taiwhanga motuhake ka tukuna nga tauira whakamatautau ki nga hohipera, ki nga whare haumanu tātaritanga ranei, ka whakahaerehia e nga tohunga ngaio kei te aukati i te urunga mo te tata ki te 5.8 piriona tangata puta noa i te ao, ina koa ko te hunga e noho ana i nga waahi kua herea nga rawa.kei hea te kore o nga taputapu koiora utu nui me nga tohunga mohio.nga haumanu 2. No reira, he hiahia tere ki te whakawhanake i tetahi punaha taiwhanga-i-te-kiripi iti utu, ngawari hoki ki te kaiwhakamahi me te kaha o te whakamatautau tohu (POCT) e taea ai e nga kairoro nga korero tātaritanga i te waa ki te whakatau i nga whakatau tātaritanga. .me te maimoatanga 3.
Ko nga aratohu a te Whakahaere Hauora o te Ao (WHO) e kii ana ko te POCT pai me utu, he hoa-kaiwhakamahi (he ngawari ki te whakamahi me te iti o te whakangungu), kia tika (kaore i nga korero kino teka, i nga hua pai teka ranei), kia tere me te pono (he pai nga taonga tukurua), me ka taea te tuku ( ka taea te rokiroki mo te wa roa me te waatea ki nga kaiwhakamahi mutunga)4.Hei whakatutuki i enei whakaritenga, me whakarato nga punaha POCT i nga ahuatanga e whai ake nei: te horopeta maha hei whakaiti i te wawaotanga a-ringa, te tuku i runga i te tono ki te tauine i te kawe reagent mo nga hua whakamatautau tika, me te mahi pono ki te tu i te wiri taiao.I tenei wa, ko te taputapu POCT e whakamahia nuitia ana ko te riipene rerenga taha5,6 he maha nga paparanga o nga kiriuhi nitrocellulose porous e turaki ana i te iti rawa o te tauira ki mua, ka tauhohe ki nga reagents i mua i te kore e nekehia e te kaha capillary.Ahakoa te painga o te utu iti, te ngawari o te whakamahi, me nga hua tere, ka taea anake te whakamahi i nga taputapu POCT e ahu mai ana i te rere mo nga whakamatautau koiora (hei tauira, nga whakamatautau huka7,8 me nga whakamatautau hapu9,10) me te kore e hiahiatia he tātaritanga-waahanga maha.nga tauhohenga (hei tauira, te utaina o nga reagents maha, te ranu, te maha).I tua atu, ko nga kaha taraiwa e whakahaere ana i te nekehanga o te wai (ara, nga kaha kapi) kaore i te pai te rite, ina koa i waenga i nga puranga, ka hua mai te kino o te whakaputa hou11 me te hanga i nga roopu rerenga taha ki te whai hua mo te kite pai12,13.
Ko nga kaha o te hangahanga i te micro- me te nanoscale kua hangaia nga waahi mo te whakawhanaketanga o nga taputapu POCT microfluidic mo nga ine ine14,15,16,17.Ma te whakatikatika i nga ahuatanga o te atanga 18, 19 me te ahuahanga o nga waahana 20, 21, 22, ka taea te whakahaere i te kaha o te kapi me te tere rere o enei taputapu.Heoi, kare e whakaaetia to ratou pono, ina koa mo nga wai tino makuku, na te kore tika o te hangahanga, nga hapa o nga rawa, me te aro ki nga wiri o te taiao.I tua atu, i te mea ka hangaia he rerenga kapi ki te atanga wai-hau, kaore e taea te whakauru atu i te rere atu, ina koa i muri i te whakakii i te hongere microfluidic ki te wai.Na reira, mo te rapunga uaua ake, me mahi etahi waahanga o te werohanga tauira24,25.
I roto i nga taputapu microfluidic, ko nga taputapu microfluidic centrifugal tetahi o nga rongoa pai mo POCT26,27.He pai ake tana tikanga taraiwa na te mea ka taea te whakahaere i te mana taraiwa ma te whakatika i te tere hurihuri.Heoi, ko te mea kino ko te kaha o te hikoi i nga wa katoa ki te taha o waho o te taputapu, he uaua ki te whakatinana i nga tauhohenga maha-taahiraa e hiahiatia ana mo nga tātaritanga uaua ake.Ahakoa etahi atu mana taraiwa (hei tauira, capillaries 28, 29 me etahi atu maha 30, 31, 32, 33, 34, 35) i tua atu i te kaha o te centrifugal ka whakauruhia mo te werohanga maha, ka taea tonu te whakawhiti wai ohorere na te mea ko enei toha taapiri he whakahau. he iti ake te rahi i te kaha centrifugal, ka whai hua noa i runga i nga awhe mahi iti, kaore ranei e waatea i runga i te tono me te tuku wai.Ko te whakauru i nga raweke pneumatic ki roto i nga microfluidics centrifugal penei i nga tikanga kinetic centrifugal 36, 37, 38, nga tikanga thermopneumatic 39 me nga tikanga pneumatic kaha 40 kua kitea he momo rereke.Ma te huarahi counterfugodynamic, he taapiri taapiri me te honohono microchannels ka whakauruhia ki roto i te taputapu mo nga mahi o waho me o roto, ahakoa ko te kaha o te pupuhi (mai i te 75% ki te 90%) ka tino ti'aturi ki te maha o nga huringa pupuhi me te viscosity. o te wai.I roto i te tikanga thermopneumatic, ko te kiriuhi taherapa me te ruuma whakawhiti wai he mea hangaia hei hiri, hei whakatuwhera ano ranei i te kokoru ina whakamahana, whakamataohia ranei te hau e mau ana.Heoi ano, ko te tatūnga whakamahana/mataotanga ka puta nga raru whakautu puhoi me te whakawhāiti i tana whakamahinga i roto i nga whakamatautau whakamaarama (hei tauira, polymerase chain reaction (PCR) whakakaha).Ma te huarahi pneumatic kaha, ko te tuku i runga i te tono me te neke whakaroto ka tutuki ma te tono tukutahi o te pehanga pai me nga tere hurihuri i runga i nga motuka tere.He huarahi angitu ano ma te whakamahi i nga kaikohiko pneumatic anake (te pehanga pai 41, 42, pehanga toraro ranei 43) me nga hoahoa takirere katia.Ma te tuku i te pehanga i roto i te ruuma pneumatic, ka panaia te wai ki mua peristaltically, a ko te katinga katia ka aukati i te rere whakamuri o te wai na te peristalsis, na reira ka mohio ki nga mahi wai uaua.Heoi, i tenei wa he iti noa te maha o nga hangarau microfluidic ka taea te mahi i nga mahi wai matatini i roto i te taputapu POCT kotahi, tae atu ki te tuku maha-mahi, te tuku i runga i te tono, te mahi pono, te rokiroki mo te wa roa, te whakahaere i nga wai-nui, me te hanga utu whai hua.Katoa i te wa ano.Ko te kore o te mahi mahi maha-taahiraa pea tetahi o nga take he iti noa nga hua POCT arumoni penei i a Cepheid, Binx, Visby, Cobas Liat, me Rhonda kua pai te whakauru ki runga i te maakete tuwhera ki tenei ra.
I roto i tenei pepa, ka whakaarohia e matou he miihini miihini miihini pneumatic i runga i te hangarau whakahuri moroiti mowhiti matomato (FAST).Ko te FAST e whakakotahi ana i nga mea katoa e tika ana i te wa kotahi mo te whānuitanga o nga reagents mai i te microliters ki te milliliters.Ko te FAST he kiriuhi rapa, he tuara me nga poraka.Ki te kore te tono o te pehanga hau, ka taea te kati nga kiriuhi, nga tuara me nga poraka ka taea te pupuri i te wai o roto mo te wa roa.Ina tukuna te pehanga e tika ana, ka whakatikahia ki te roa o te reanga, ka whakawhānuihia te diaphragm ka panaia te tuara ki te waahi tuwhera, ka taea te rere o te wai.Ma tenei ka taea te inenga maha o nga wai i roto i te riima, i te wa kotahi, i te raupapa, i te huarahi whiriwhiri ranei.
Kua whakawhanakehia e matou he punaha PCR ma te whakamahi i te FAST ki te whakaputa i nga hua whakautu-i-tauira mo te kitenga o nga huaketo rewharewha A me B (IAV me IBV).I tutuki i a maatau te iti ake o te whakakitenga (LOD) o te 102 kape/mL, i whakaatuhia e to maatau whakamatautau maha mo te IAV me te IBV me te whakaae ki te tohu mate rewharewha.Ko nga hua whakamatautau haumanu e whakamahi ana i te tauira pania ihu mai i nga turoro 18 me nga tangata hauora 18 e whakaatu ana i te pai o te whakakotahitanga o te kaha o te rewharewha me te RT-PCR paerewa (pearson coefficients > 0.9).Ko nga hua whakamatautau haumanu e whakamahi ana i te tauira pania ihu mai i nga turoro 18 me nga tangata hauora 18 e whakaatu ana i te pai o te whakakotahitanga o te kaha o te rewharewha me te RT-PCR paerewa (pearson coefficients > 0.9).Результати клинических испытаний с использованием образца мазка из носа от 18 пациентов и 18 здоровых лицитет нтенсивности флуоресценции стандартной ОТ-ПЦР (коэффициенты Пирсона > 0,9).Ko nga hua o nga whakamatautau haumanu e whakamahi ana i te tauira nasal swab mai i nga turoro 18 me nga tangata hauora 18 e whakaatu ana i te pai o te whakaaetanga i waenga i te kaha o te rewharewha o te RT-PCR paerewa (pearson's coefficients > 0.9).0.9） . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Результати клинических испытаний с использованием образцов назальных мазков от 18 пациентов и 18 здоровых лице лице жду интенсивностью флуоресценции и стандартной ОТ-ПЦР (коэффициент Пирсона > 0,9).Ko nga hua o nga whakamatautau haumanu ma te whakamahi i nga tauira o te nasal swab mai i nga turoro 18 me nga tangata hauora 18 i whakaatu i te pai o te whakaaetanga i waenga i te kaha o te rewharewha me te paerewa RT-PCR (pearson's coefficient > 0.9).Ko te utu tata mo te taputapu FAST-POCT tata ki te US$1 (Ripanga Tāpiri 1) ka taea te whakaheke ake ma te whakamahi i nga tikanga whakangao nui (hei tauira, werohia).Ko te mea pono, kei nga taputapu POCT i runga i te FAST nga ahuatanga e tika ana i whakahaua e WHO me te hototahi ki nga tikanga whakamatautau koiora hou penei i te paihikara waiariki plasma44, immunoassays45 kore-whakakaha me nga whakamatautau mahi nanobody46 ko te tuara o nga punaha POCT.taea.
I te piki.Ko te 1a e whakaatu ana i te hanganga o te papanga FAST-POCT, e wha nga ruuma wai: he ruuma i mua i te rokiroki, he ruma whakaranu, he ruuma tauhohenga, he ruuma ururua.Ko te mea nui ki te whakahaere i te rere o te wai ko te hoahoa FAST (kei roto i nga kiriuhi rapa, nga tuara me nga poraka) kei roto i te ruuma rokiroki-mua me te ruma whakaranu.Hei tikanga pneumatically actuated, te hoahoa FAST whakarato te mana rere wē pū, tae atu ki te whakakā kati/tuwhera, dosing maha, i runga i-tono tuku wai, mahi pono (hei tauira, te kore aro ki te wiri taiao), me te rokiroki mo te wa roa.Ko te papanga FAST-POCT e wha nga paparanga: he paparanga tuara, he paparanga kiriata elastic, he paparanga kiriata kirihou, me tetahi paparanga hipoki, e whakaatuhia ana i roto i te tirohanga nui i te Fig. ).Ko nga hongere katoa me nga ruma kawe wai (pērā i te rokiroki o mua me te ruuma tauhohenga) ka mau ki roto i nga taputapu PLA (waikawa polylactic) mai i te 0.2 mm (te waahanga angiangi) ki te 5 mm te matotoru.Ko te papanga kiriata rapa he 300 µm te matotoru o te PDMS ka ngawari te whakawhanui i te wa e pa ana te pehanga hau na runga i tona "matotoru angiangi" me te iti o te whakaraeraetanga (mo te 2.25 MPa47).Ko te paparanga kiriata polyethylene he mea hanga ki te polyethylene terephthalate (PET) me te matotoru o te 100 µm hei tiaki i te kiriata rapa mai i te tino rerekee na te pehanga hau.E rite ana ki nga ruma, ko te paparanga tïpako he reera hono ki te paparanga uhi (i hangaia mai i te PLA) ma nga inihi hei whakahaere i te rere o te wai.I whakapirihia te kiriata rapa ki te paparanga tuara ma te whakamahi i te riipene whakapiri-rua (ARseal 90880) ka hipoki ki te kiriata kirihou.E toru nga paparanga i whakaemihia ki runga i te tïpako ma te whakamahi i te hoahoa T-topenga i te paparanga uhi.Ko te rawhi-T he aputa i waenganui i nga waewae e rua.I te whakaurunga o te topenga ki roto i te riu, ka piko paku nga waewae e rua, katahi ka hoki ki te ahua o mua, ka herea kia piri te taupoki me te tuara i a raua e haere ana i roto i te riu (Taupiri Pikitia S1).Ka whakaemihia nga papa e wha ma te whakamahi i nga hononga.
Te hoahoa hoahoa o te papaaho e whakaatu ana i nga momo waahanga mahi me nga ahuatanga o te FAST.b Whakanuia te hoahoa o te turanga FAST-POCT.c Whakaahua o te papa i te taha o te moni hauwha taara US.
Ko te mahinga mahi o te papanga FAST-POCT e whakaatuhia ana i te Whakaahua 2. Ko nga waahanga matua ko nga poraka i runga i te paparanga turanga me nga hiwi i runga i te paparanga hipoki, ka puta he hoahoa pokanoa i te wa e huihuia ana nga papa e wha ma te whakamahi i te ahua T. .Karekau he pehanga hau (whakaahua 2a), ko te urunga pokanoa ka whakapikoa te hinge me te rerekee, ka tukuna he kaha hiri ki roto i te tauera hei pehi i te kiriata elastic ki te poraka, ka tautuhia te wai i roto i te kohao hiri. hei ahua hiri.Me tohu kei roto i tenei ahua, ka piko te tuara ki waho, e whakaatuhia ana i te tirohanga taha ki te 2a.Ina tukuna mai te hau (Fig. 2b), ka toro atu te membrane elastic ki waho ki te uhi, ka pana te reihi ki runga, na reira ka tuwhera he aputa i waenga i te reihi me te paraka kia rere ai te wai ki roto i te ruuma e whai ake nei, e kiia ana he ahua tuwhera. .Whai muri i te tukunga o te pehanga hau, ka hoki mai te reanga ki tona turanga taketake ka mau tonu na te kaha o te hinge.Ko nga riipene whakaata o nga nekehanga reihi ka whakaatuhia ki te kiriata taapiri S1.
A. Te hoahoa hoahoa me nga whakaahua ina katia.I te kore o te pehanga, ka pehia e te reihi te membrane ki te poraka, ka hirihia te wai.b Kei te pai te ahua.Ina pehia ana te pehanga, ka whakawhānuihia te kiriuhi ka panaia te tuara ki runga, ka tuwhera te hongere ka rere te wai.c Whakatauhia te rahi o te pehanga arohaehae.Ko nga ahuatanga o te ahua ko te roa o te reihi (L), te tawhiti i waenga i te rēreti me te hiwi (l) me te matotoru o te toronga o te reihi (t).Ko te Fs te kaha whakawhäiti i te ira throttle point B. Ko te q te tohatoha riterite te uta i runga i te tuara.Ko te Tx* te tohu i te taipana i whakawhanakehia e te tauera hinged.Ko te pehanga nui ko te pehanga e hiahiatia ana hei hiki ake i te reanga kia rere te wai.d Nga hua ariā me nga hua whakamatautau o te hononga i waenga i te pehanga arohaehae me te rahi o te huānga.n = 6 nga whakamatautau motuhake i mahia, ka whakaatuhia nga raraunga hei ± inenga paerewa.Ko nga raraunga mata ka whakaatuhia hei konae raraunga mata.
Kua hangaia he tauira tātari i runga i te ariā kurupae hei tātari i te whakawhirinakitanga o te pehanga nui Pc ka tuwhera te aputa i runga i nga tawhā āhuahanga (hei tauira, ko L te roa o te reanga, l ko te tawhiti i waenga i te poraka me te hinge, S is the lever Ko te waahi whakapiri ki te wai t ko te matotoru o te toronga lever, penei i te Whakaatu 2c).I roto i nga korero taapiri me te Whakaaturanga Tāpiri S3, ka tuwhera te āputa ina \({P}_{c}\ge \frac{2{F}_{s}l}{SL}\), ko Fs te taipana \ ({T}_{x}^{\ast}(={F}_{s}l)\) ki te whakakore i nga kaha e pa ana ki te urunga pokanoa me te whakapiko i te inihi.Ko te whakautu whakamatautau me te tauira tātari e whakaatu ana i te pai o te whakaaetanga (Fig. 2d), e whakaatu ana ka piki ake te pehanga nui Pc ki te piki ake o te t/l me te heke iho o te L, he maamaa te whakamarama e te tauira kurupae puāwaitanga, ara, ka piki te taipana ki te t/Lift .No reira, ko ta maatau tātaritanga ariā e whakaatu marama ana ka taea te whakahaere tika i te pehanga nui ma te whakatikatika i te roa o te reanga L me te tauwehenga t / l, e whakarato ana i te kaupapa nui mo te hoahoatanga o te papaaho FAST-POCT.
Ko te kaupapa FAST-POCT e whakarato ana i te tukunga maha (e whakaatuhia ana i te Whakaahua 3a me te whakaurunga me te whakamatautau), koinei te mea tino nui o te POCT angitu, ka rere nga wai ki tetahi huarahi me tetahi ota (cascade, tukutahi, raupapa) ranei te hiko maha whiriwhiri. tuku .– mahi horopeta.I te piki.Ko te 3a(i) e whakaatu ana i te aratau whakangao totika e rua, neke atu ranei nga ruuma e ruia ana ma te whakamahi i nga poraka hei wehe i nga momo tauhohenga me te tauera hei whakahaere i te ahua tuwhera me te kati.Ka pehia ana te pehanga, ka rere te wai mai i runga ki te ruma o raro i roto i te tikanga cascade.Me tohu ka taea te whakakii i nga ruuma cascade ki nga matū maku, matū maroke ranei penei i te paura lyophilized.I roto i te whakamatautau i te Whakaahua 3a(i), ka rere te waituhi whero mai i te ruma o runga me te paura waikano puru (parapara sulfate) ki roto i te ruma tuarua, ka huri ki te puru pouri ina tae ki te ruma o raro.E whakaatu ana hoki i te pehanga whakahaere mo te wai e pupuhi ana.Waihoki, ka honoa tetahi reima ki nga ruuma e rua, ka waiho hei aratau werohanga tukutahi, penei i te pikitia.3a(ii), ka taea te toha riterite te wai ki runga i nga ruuma e rua, neke atu ranei ina pehia ana te pehanga.I te mea ko te pehanga nui kei runga i te roa o te reanga, ka taea te whakarite i te roa o te reanga kia tutuki ai te tauira werohanga raupapa e whakaatuhia ana i te piki.3a(iii).I honoa he taumahi roa (me te pehanga arohaehae Pc_long) ki te ruuma B me tetahi taumahi poto (me te pehanga arohaehae Pc_short > Pc_long) i honoa ki te ruuma A. I te mea ka whakamahia te pehanga P1 (Pc_long < P1 < Pc_short), ko te wai whero anake ka rere ki te ruma B a ka piki te pehanga ki te P2 (> Pc_short), ka rere te wai kikorangi ki te ruma A. Ko tenei aratau werohanga raupapa e pa ana ki nga wai rereke e whakawhiti ana ki o raatau ruma e pa ana ki te raupapa, he mea nui mo te POCT angitu. taputapu.I honoa he taumahi roa (me te pehanga arohaehae Pc_long) ki te ruuma B me tetahi taumahi poto (me te pehanga arohaehae Pc_short > Pc_long) i honoa ki te ruuma A. I te mea ka whakamahia te pehanga P1 (Pc_long < P1 < Pc_short), ko te wai whero anake ka rere ki te ruma B a ka piki te pehanga ki te P2 (> Pc_short), ka rere te wai kikorangi ki te ruma A. Ko tenei aratau werohanga raupapa e pa ana ki nga wai rereke e whakawhiti ana ki o raatau ruma e pa ana ki te raupapa, he mea nui mo te POCT angitu. taputapu.Длинный рычаг (с критическим давлением Pc_long) был соединен с камерой B, а короткий рычаг (с критическим да >влеским да >вским да > ен с камерой A. При приложении давления P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) только жидкость, выделенная красным может течь в камеру B, и когда давление было увеличено до P2 (> Pc_short), синяя жидкость может течь в камеру A. Эот телемим няется к различным жидкостям, последовательно перемещаемым в соответствующие камеры, что имеет решающение перемещаемым в соответствующие камеры, что имеет решающение с.I honoa he taima roa (me te pehanga arohaehae Pc_long) ki te ruuma B, ka honoa he taumahi poto (me te pehanga arohaehae Pc_short > Pc_long) ki te ruuma A. Ina whakamahia te pehanga P1 (Pc_long < P1 < Pc_short), ko te wai anake te tohu. i roto i te whero ka rere ki roto i te ruma B, a ka piki ake te pehanga ki te P2 (> Pc_short), ka rere te wai kikorangi ki roto i te ruma A. Ka whakamahia tenei aratau werohanga raupapa ki nga wai rereke e whakawhitia ana ki ia ruma, he mea tino nui. mo POCT angitu.taputapu. Длинный рычаг (критическое давление Pc_long) соединен с камерой B, а короткий рычаг (критическое давление Pc_long) poto poto > Pc.Ko te ringa roa (Pc_long te pehanga arohaehae) e hono ana ki te ruma B me te ringa poto (te pehanga arohaehae Pc_short > Pc_long) e hono ana ki te ruma A.При приложении давления P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) в камеру B может поступать только красная жидкость, а при увеличелиди при увеличенид еру A может поступать синяя жидкость.Ina whakamahia te pehanga P1 (Pc_long < P1 < Pc_short), ka uru te wai whero ki roto ki te ruma B, a ka piki te pehanga ki te P2 (> Pc_short), ka uru te wai kikorangi ki te ruma A. He pai tenei aratau werohanga raupapa mo te whakawhiti raupapa o he rereke nga wai ki roto i ia ruma, he mea tino nui mo te mahi angitu o te taputapu POCT.Ko te ahua 3a(iv) e whakaatu ana i te aratau werohanga whiriwhiri, he poto te ruuma matua (me te pehanga nui Pc_short) me te roa (me te pehanga nui Pc_long <Pc_short) i honoa ki te ruma A me te ruma B, hei taapiri. ki tetahi atu hongere rangi e hono ana ki te ruma B. Hei whakawhiti i te wai ki te ruma A i te tuatahi, ko te pehanga P1 (Pc_long <P1 <Pc_short) me te P2 (P2> P1) me te P1 + P2 > Pc_short i tukuna ki te taputapu i te wa ano.Ko te ahua 3a(iv) e whakaatu ana i te aratau werohanga whiriwhiri, he poto te ruuma matua (me te pehanga nui Pc_short) me te roa (me te pehanga nui Pc_long
he Whakaahua o te taumahi mahi maha, ara (i) riipapa, (ii) tukutahi, (iii) raupapa, me (iv) mahi whiriwhiri.Ko nga pihi e tohu ana i te rerenga mahi me nga tawhā o enei momo tohatoha e wha.b Nga hua o nga whakamatautau rokiroki mo te wa roa i roto i te wai whakaheke me te waihano.n = 5 nga whakamatautau motuhake i mahia, ka whakaatuhia nga raraunga hei ± sd c.Ko nga whakaaturanga whakamatautau pumau i te wa e noho ana te taputapu FAST me te taputapu capillary valve (CV) (i) te pateko me te (ii) te wiri.(iii) Rōrahi me te wa mo nga taputapu FAST me te CV i nga momo iarere koki.d Te whakaputanga o nga hua whakamatautau i runga i te tono (i) taputapu FAST me (ii) taputapu CV.(iii) Te hononga i waenga i te rōrahi me te wa mo nga taputapu FAST me te CV e whakamahi ana i te aratau pehanga mokowhiti.Pae tauine katoa, 1 cm.Ka whakaratohia nga raraunga mata hei konae raraunga mata.
Ko te rokiroki mo te wa roa o nga reagents tetahi atu waahanga nui o te taputapu POCT angitu e taea ai e nga kaimahi kore whakangungu te whakahaere i nga reagents maha.Ahakoa te maha o nga hangarau kua whakaatu i to raatau kaha mo te rokiroki mo te wa roa (hei tauira, 35 microdispensers, 48 pueke namunamu, me nga putea rakau 49), ka hiahiatia he waahanga tango motuhake hei whakauru i te kete, ka piki ake te utu me te uaua;I tua atu, kare e taea e enei taputapu rokiroki te tuku i runga i te tono, ka mutu te moumou o nga reagents na te toenga i roto i te kete.I manatokohia te kaha o te rokiroki mo te wa roa ma te whakahaere i te whakamatautau ora tere ma te whakamahi i nga rauemi PMMA miihini CNC na te iti o te taratara me te atete ki te urunga hau (Whakaahua Tāpiri S5).I whakakiia te taputapu whakamatautau ki te wai whakaheke (te wai whakaheke) me te 70% te waihano (whakaahua i nga reagents volatile) i te 65°C mo te 9 ra.I penapenahia nga wai kua whakakorehia me te waiwaro ma te whakamahi i te pepa konumohe hei aukati i te uru mai i runga.Ko te whārite Arrhenius me te pūngao whakahohenga kuhu e korerotia ana i roto i nga tuhinga50,51 i whakamahia ki te tatau i te taurite-waahi.I te piki.Ko te 3b e whakaatu ana i nga hua mate taimaha toharite mo nga tauira e 5 kua rongoa ki te 65°C mo nga ra 9, he rite ki te 0.30% mo te wai whakaheke me te 0.72% mo te 70% te waihano mo te 2 tau i te 23°C.
I te piki.Ko te 3c e whakaatu ana i te whakamatautau wiri.I te mea ko te puera capillary (CV) te tikanga whakahaere wai tino rongonui i waenga i nga taputapu POCT28,29, he taputapu CV 300 µm te whanui me te 200 µm hohonu i whakamahia hei whakataurite.Ka kitea i te wa e noho tonu ana nga taputapu e rua, ka raka te wai i roto i te papaaapapa FAST-POCT me te wai i roto i te taputapu CV na te tipu ohorere o te hongere, e whakaiti ana i nga kaha kapi.Heoi, i te pikinga o te auau koki o te wiri orbital, ka hiri tonu te wai i roto i te turanga FAST-POCT, engari ka rere te wai o te taputapu CV ki roto i te ruma o raro (tirohia hoki te Kiriata Tāpiri S3).E tohu ana tenei ka taea e nga hingini whakaheke o te papaapapa FAST-POCT te whakamahi i te kaha miihini ki te kōwae kia kati te wai i roto i te ruma.Heoi, i roto i nga taputapu CV, ka mau tonu te wai na te taurite i waenga i te totoka, te hau, me nga wahanga wai, te hanga koretake, me te wiri ka raru te toenga ka puta te rere ohorere.Ko te painga o te papanga FAST-POCT ko te whakarato i nga mahi pono me te karo i nga ngoikoretanga i te aroaro o nga wiri ka puta i te wa e tukuna ana me te mahi.
Ko tetahi atu waahanga nui o te papanga FAST-POCT ko tana tuku i runga i te tono, he whakaritenga matua mo te tātari ine.I te piki.Ka whakatauritehia e 3d te tuku i runga i te tono o te turanga FAST-POCT me te taputapu CV.Mai i te piki.3d(iii) ka kite tatou he tere te whakautu a te taputapu FAST ki te tohu pehanga.I te wa i tukuna ai te pehanga ki te papa FAST-POCT, ka rere te wai, ka tukuna te pehanga, ka mutu tonu te rere (Fig. 3d(i)).Ka taea te whakamarama i tenei mahi ma te tere tere o te hokinga mai o te hinge, e peehi ana i te tuara ki te poraka, ka kati i te ruma.Heoi, ka rere tonu te wai i roto i te taputapu CV, i te mutunga ka puta he nui o te wai ohorere tata ki te 100 µl i muri i te tukunga o te pehanga (Whakaahua 3d(ii) me te Kiriata Tāpiri S4).Ka taea te whakamarama i tenei ma te ngaro atu o te paanga o te kapi kapila i te whakamakukutanga o te CV i muri i te werohanga tuatahi.
Ko te kaha ki te hapai i nga wai he rereke te makuku me te pokey i roto i te taputapu kotahi ka noho tonu he wero mo nga tono POCT.Ko te ngoikore o te makuku ka paheke, ki etahi atu ahua rere ohorere ranei i roto i nga hongere, me nga taputapu taapiri penei i te whakaranu vortex, centrifuges me nga tātari e hiahiatia ana hei whakarite i nga wai tino pokarekare 52 .I whakamatauria e matou te hononga i waenga i te pehanga arohaehae me nga taonga wai (me te whanuitanga o te makuku me te pokey).Ka whakaatuhia nga hua ki te Ripanga 1 me te Ataata S5.Ka kitea ka taea te hiri i roto i te ruuma nga wai o te makuku me te viscosity, a, ka pehia te pehanga, tae noa ki nga wai me te viscosity ki runga ki te 5500 cP ka taea te whakawhiti ki te ruma tata, ka taea te kite i nga tauira me te teitei. te pokey (arā te sputum, he tauira tino pokarekare e whakamahia ana mo te tātaritanga o nga mate manawa).
Ma te whakakotahi i nga taputapu tuku maha-mahi i runga ake nei, ka taea te whakawhanake i te whānuitanga o nga taputapu POCT e ahu mai ana i te FAST.Ka whakaatuhia he tauira i te Whakaahua 1. Kei roto i te tipu he ruuma i mua i te rokiroki, he ruma ranu, he ruuma tauhohenga me tetahi ruma ururua.Ka taea te rongoa i nga reagents i roto i te ruuma i mua i te rokiroki mo nga wa roa ka tukuna ki roto i te ruma whakaranu.Ma te pehanga tika, ka taea te whakawhiti i nga tauhohenga whakauru ki tetahi ruma ururua, ki tetahi ruma tauhohenga ranei.
Na te mea ko te kitenga PCR te paerewa koura mo te kimi tukumate penei i te H1N1 me te COVID-19 me te maha o nga mahi tauhohenga, i whakamahia e matou te papaaa FAST-POCT mo te kitenga PCR hei tono.I te piki.Ko te 4 e whakaatu ana i te tukanga whakamatautau PCR ma te whakamahi i te papanga FAST-POCT.Tuatahi, ko te reagent eluting, te reagent microbead autō, te wairewa horoi A, me te wairewa horoi W i paipa ki roto i nga ruma rokiroki-mua E, M, W1 me W2, ia.Ko nga waahanga o te RNA adsorption e whakaatuhia ana i te piki.4a a e whai ake nei: (1) ka pehia te pehanga P1 (=0.26 pae), ka neke te tauira ki roto i te ruma M ka tukuna ki roto i te ruuma whakaranu.(2) Ko te pehanga hau P2 (= 0.12 bar) ka tukuna ma te tauranga A e hono ana ki raro o te ruma whakaranu.Ahakoa te maha o nga tikanga ranu kua whakaatu i to ratau kaha ki te whakaranu wai i runga i nga papaaa POCT (hei tauira, te ranu nakahi 53, te ranu matapōkere 54 me te ranu puranga 55), kaore tonu i te pai te pai o te ranu me te whaihua.Ka whakamahia e ia te tikanga whakaranu mirumiru, ka uru te hau ki raro o te ruuma whakaranu ki te hanga mirumiru i roto i te wai, ka mutu ka taea e te vortex kaha te whakakotahi i roto i nga hēkona.I mahia nga whakamatautau whakaranu mirumiru ka whakaatuhia nga hua ki te Whakaaturanga Tāpiri S6.Ka kitea ka tukuna he pehanga 0.10 pae, kia 8 hēkona te roa o te whakaranu.Ma te whakanui ake i te pehanga ki te 0.20 pae, ka oti te whakaranu i roto i te 2 hēkona.Ko nga tikanga mo te tatau i te pai o te whakaranu ka whakaatuhia ki te waahanga Tikanga.(3) Whakamahia he aukume rubidium hei tango i nga pirepire, ka pehia te P3 (= 0.17 pae) ma te tauranga P kia nekehia nga reagents ki roto i te ruuma para.I te piki.Ko te 4b,c e whakaatu ana i nga hikoi horoi hei tango i nga poke o te tauira penei: (1) Ko te otinga horoi A mai i te ruuma W1 ka tukuna ki roto i te ruuma whakaranu pehanga P1.(2) Na ka mahi i te mahi whakaranu mirumiru.(3) Ka whakawhitia te wairewa horoi A ki te ruuma wai para, ka kumea mai e te aukume nga moroiti kei roto i te ruma whakaranu.Ko te horoi W (Fig. 4c) he rite ki te horoi A (Fig. 4b).Me tohu ko ia taahiraa horoi A me te W i mahia e rua.Ko te Whakaahua 4d e whakaatu ana i nga hikoi elution ki te whakakore i te RNA mai i nga pirepire;he rite tonu te whakamaaramatanga me te ranu whakaurunga ki te RNA adsorption me te horoi horoi i whakaahuatia i runga ake nei.I te wa e whakawhitia ana nga reagents elution ki roto i te ruma tauhohenga PCR i raro i nga pehanga P3 me te P4 (= 0.23 bar), ka tae te pehanga nui ki te hiri i te ringa o te ruma tauhohenga PCR.Waihoki, ka awhina ano te pehanga P4 ki te hiri i te huarahi ki te ruuma ururua.No reira, i tohatohahia nga reagents elution katoa ki waenga i nga ruma tauhohenga PCR e wha hei timata i nga tauhohenga PCR maha.Ko te tikanga i runga ake nei ka whakaatuhia ki te Whitiāhua Tāpiri S6.
I roto i te taahiraa RNA adsorption, ka whakauruhia te tauira ki te kokoru M ka werohia ki roto i te ruma whakaranu me te otinga pirepire kua rongoa i mua.I muri i te whakaranu me te tango i nga granules, ka tohatohahia nga reagents ki roto i te ruuma ururua.b me te horoi horoi, whakauru i nga momo reagents horoi i mua i te rongoa ki roto i te ruma ranu, ka mutu te ranu me te tango i nga pirepire, whakawhitia nga reagents ki te ruuma wai para.d Te hikoi elution: I muri i te whakauru i nga reagents elution, te ranu me te tangohanga pirepire, ka whakawhitia nga reagents ki te ruma tauhohenga PCR.Ko nga pihi e whakaatu ana i te rerenga mahi me nga tawhā e pa ana ki nga momo waahanga.Ko te pehanga ko te pehanga e mahia ana i roto i nga ruma takitahi.Ko te rōrahi te rōrahi o te wē i roto i te rūma whakaranu.He 1 cm te roa o nga pae tauine katoa.Ka whakaratohia nga raraunga mata hei konae raraunga mata.
I mahia he tikanga whakamatautau PCR me te Whakaaturanga Taapiri S7 e whakaatu ana i nga tuhinga waiariki tae atu ki te 20 meneti o te wa whakawhiti whakamuri me te 60 meneti o te wa paihikara waiariki (95 me te 60 °C), me tetahi huringa waiariki he 90 s (Tāpiri Whitiāhua S7)..Ko te FAST-POCT he iti ake te wa ki te whakaoti i tetahi huringa waiariki (90 hēkona) i te RT-PCR tikanga (180 hēkona mo te huringa waiariki kotahi).Ka taea te whakamarama i tenei ma te waahanga teitei o te mata ki te owehenga rōrahi me te iti o te waiariki o te ruma tauhohenga micro-PCR.Ko te mata o te ruma he 96.6 mm2 me te rōrahi ruma he 25 mm3, e 3.86 te rahi o te mata ki te rōrahi.Ka kitea i roto i te Whakaaturanga Tāpiri S10, ko te waahi whakamatautau PCR o to maatau papaahi he riu kei te taha o muri, e 200 µm te matotoru o raro o te ruma PCR.Ka pirihia he papa rapa wera wera ki te mata whakamahana o te kaitahuri mahana, kia mau te whakapiri ki muri o te pouaka whakamatautau.Ma tenei ka whakaiti i te waiariki o te papaahi me te whakapai ake i te pai o te whakamahana / whakamatao.I te wa o te paihikara waiariki, ka rewa te parawini kua mau ki roto i te papaaapapa ka rere ki roto i te ruma tauhohenga PCR, hei hiri hei aukati i te whakaetonga reagent me te poke o te taiao (tirohia te Whitiāhua Tāpiritanga S8).
Ko nga tukanga rapu PCR katoa e whakaahuatia ana i runga ake nei he mea aunoa ma te whakamahi i tetahi taputapu FAST-POCT kua oti te hanga, kei roto he waeine mana pehanga kua whakaritea, he wae tango autō, he wae whakamahana, he tohu hopu me te wae tukatuka.Ko te tuhipoka, i whakamahia e matou te papanga FAST-POCT mo te wehenga RNA katahi ka whakamahia nga tauira RNA kua tangohia mo nga tauhohenga PCR ma te whakamahi i te punaha FAST-POCT me te punaha PCR papamahi hei whakataurite.He rite tonu nga hua ki te Whakaaturanga Tāpiri S8.Ka mahia e te kaiwhakahaere he mahi ngawari: ka whakauru i te tauira ki roto i te ruma-M ka whakauruhia te papa ki roto i te taputapu.Ka waatea nga hua whakamatautau ine i roto i te 82 meneti.Ka kitea nga korero taipitopito mo nga taputapu FAST-POCT i te ahua taapiri.C9, C10 me C11.
Ko te rewharewha i puta mai i te rewharewha A (IAV), B (IBV), C (ICV) me D (IDV) he ahuatanga noa o te ao.I roto i enei, ko IAV me IBV te kawenga mo nga keehi tino kino me nga mate urutaa o te tau, ka pangia te 5-15% o te taupori o te ao, ka 3-5 miriona nga keehi kino me te mate 290,000-650,000 ia tau.Nga mate manawa56,57.He mea nui te tātaritanga moata o te IAV me te IB hei whakaiti i te mate me te taumahatanga ohaoha e pa ana.I roto i nga tikanga taatai e waatea ana, ko te reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) e kiia ana ko te tino tairongo, motuhake, me te tika (> 99%)58,59.I roto i nga tikanga taatai e waatea ana, ko te reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) e kiia ana ko te tino tairongo, motuhake, me te tika (> 99%)58,59.Среди доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦер слести) специфичной и точной (> 99%)58,59.I roto i nga tikanga taatai e waatea ana, ko te reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) e kiia ana ko te tino tairongo, motuhake me te tika (> 99%)58,59. Из доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) считат специфичной и точной (>99%)58,59.Mai i nga tikanga taatai e waatea ana, ko te reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) e kiia ana ko te tino tairongo, motuhake me te tika (> 99%) 58,59.Heoi, ko nga tikanga tuku iho a RT-PCR me pai te paipa, te ranu, te tuku me te whakawhiti wai, me te whakaiti i te whakamahinga a nga tohunga i nga waahanga iti rawa.I konei, i whakamahia te papanga FAST-POCT mo te PCR rapunga o IAV me IBV, ia, ki te whiwhi i to raatau rohe iti o te kitenga (LOD).I tua atu, ko te IAV me te IBV kua whakahiatohia ki te wehewehe i waenga i nga momo pathotypes puta noa i nga momo, e whakarato ana i te kaupapa whakaari mo te tātari ira me te kaha ki te rongoa tika i te mate.
I te piki.Ko te 5a e whakaatu ana i nga hua o te whakamatautau HAV PCR ma te whakamahi i te 150 µl o te RNA viral pure hei tauira.I te piki.Ko te 5a(i) e whakaatu ana i te kuhanga HAV o te 106 kape/ml, ka tae te kaha o te fluorescence (ΔRn) ki te 0.830, a, ka whakahekehia te kukū ki te 102 kape/ml, ka taea tonu te ΔRn ki te 0.365, e rite ana ki te teitei ake i tera. o te roopu whakahaere kino kore (0.002), tata ki te 100 nga wa teitei ake.Mo te inenga i runga i nga whakamatautau motuhake e ono, i hangaia he kurupae whakatikatika raina i waenga i te kukū o te poro me te paepae huringa (Ct) o IAV (Fig. 5a(ii)), R2 = 0.993, mai i te 102-106 kape/mL.he pai nga hua ki nga tikanga RT-PCR tikanga.I te piki.Ko te 5a(iii) e whakaatu ana i nga whakaahua korikori o nga hua whakamatautau i muri i nga huringa 40 o te turanga FAST-POCT.I kitea e matou ka taea e te papanga FAST-POCT te kite i te HAV iti iho i te 102 kape/mL.Heoi, ko te tikanga tuku iho kaore he uara Ct i te 102 kape/mL, ka waiho hei LOD mo te 103 kape/mL.I whakapae matou na te kaha nui o te whakaranu mirumiru.I mahia nga whakamatautau PCR i runga i te IAV RNA kua purea hei arotake i nga momo momo ranu, tae atu ki te ranu wiri (he rite tonu te tikanga ranu ki te mahi RT-PCR tikanga), te ranu ipu (tenei tikanga, 3 s i te 0.12 pae) me te kore whakaranu hei roopu whakahaere. ..Ka kitea nga hua i roto i te Whakaahua Tāpiri S12.Ka taea te kite i te nui ake o te kukū RNA (106 kape/mL), he rite tonu nga uara Ct o nga tikanga whakaranu rereke ki te whakaranu mirumiru.I te hekenga o te kukū RNA ki te 102 kape/mL, karekau he uara Ct o te ranunga wiri me nga mana whakahaere, i te mea ko te tikanga whakaranu mirumiru i hoatu tonu te uara Ct o 36.9, kei raro iho i te paepae Ct o 38. Ko nga hua e whakaatu ana i tetahi ahuatanga whakaranu nui. vesicles, kua whakaatuhia hoki i roto i etahi atu tuhinga, tera pea ka whakamarama he aha te ahua o te paanui FAST-POCT he paku teitei ake i te RT-PCR tikanga.I te piki.Ko te 5b e whakaatu ana i nga hua o te tātari PCR o nga tauira IBV RNA kua purea mai i te 101 ki te 106 kape/ml.Ko nga hua i rite ki te whakamatautau IAV, kua tutuki he R2 = 0.994 me te LOD o te 102 kape/mL.
he tātaritanga PCR o te rewharewha A huaketo (IAV) me nga kuhanga IAV mai i te 106 ki te 101 kape/mL ma te whakamahi i te parepare TE hei mana kino (NC).(i) Te ānau rewharewha o te wa tuturu.(ii) Anau whakatikatika raina i waenga i te kukū IAV RNA taukorikori me te paepae huringa (Ct) mo nga tikanga whakamatautau tere me te tikanga.(iii) IAV FAST-POCT atahanga rewharewha i muri i nga huringa 40.b, te kitenga PCR o te rewharewha B huaketo (IBV) me te (i) te tuāwhiorangi rewharewha o te waa.(ii) Anau whakatikatika raina me te (iii) Atahanga whiti-POCT IBV i muri i nga huringa 40.Ko te rohe iti o te kitenga (LOD) mo te IAV me te IBV e whakamahi ana i te turanga FAST-POCT he 102 kape/mL, he iti ake i nga tikanga tikanga (103 kape/mL).c Nga hua whakamatautau maha mo te IAV me te IBV.I whakamahia te GAPDH hei mana pai, a i whakamahia te buffer TE hei mana kino ki te aukati i te poke me te whakakaha papamuri.E wha nga momo tauira rereke ka taea te wehewehe: (1) GAPDH-anake nga tauira kino ("IAV-/IBV-");(2) IAV mate ("IAV+/IBV-") me IAV me GAPDH;(3) Te mate IBV ("IAV-/IBV+") me te IBV me te GAPDH;(4) IAV/IBV mate (“IAV+/IBV+”) with IAV, IBV and GAPDH.Ko te raina iraira e tohu ana i te raina paepae.n = 6 nga whakamatautau koiora i mahia, ka whakaatuhia nga raraunga hei ± inenga paerewa.Ko nga raraunga mata e whakaatuhia ana hei konae raraunga mata.
I te piki.Ko te 5c e whakaatu ana i nga hua o te whakamatautau maha mo te IAV/IBV.I konei, i whakamahia te lysate huaketo hei tauira otinga hei whakakapi i te RNA kua purea, a e wha nga tohu tuatahi mo te IAV, IBV, GAPDH (mana pai) me TE buffer (mana kino) i taapirihia ki nga ruma tauhohenga rereke e wha o te turanga FAST-POCT.Ka whakamahia nga mana pai me te kino ki konei hei aukati i te poke me te whakarei ake i te papamuri.I wehewehea nga whakamatautau ki nga roopu e wha: (1) GAPDH-kino nga tauira ("IAV-/IBV-");(2) IAV-infected (“IAV+/IBV-”) versus IAV and GAPDH;(3) IBV-.kua pangia (“IAV-”) -/IBV+”) IBV me GAPDH;(4) IAV/IBV (“IAV+/IBV+”) mate ki IAV, IBV me GAPDH.I te piki.Ko te 5c e whakaatu ana i te wa i whakamahia ai nga tauira kino, ko te kaha o te rererangi ΔRn o te ruma whakahaere pai ko 0.860, me te ΔRn o IAV me IBV he rite ki te mana kino (0.002).Mo nga roopu IAV+/IBV-, IAV-/IBV+ me IAV+/IBV+, ko nga IAV/GAPDH, IBV/GAPDH me te IAV/IBV/GAPDH nga kamera i whakaatu i te kaha o te rere o te rere, i te mea ko etahi atu o nga kamera i whakaatu i te kaha o te rere ki te papamuri. taumata 40 i muri i te paihikara waiariki.Mai i nga whakamatautau i runga ake nei, i whakaatu te turanga FAST-POCT i te tino motuhake me te tuku i a maatau ki te tarai i nga momo mate rewharewha i te wa kotahi.
Hei whakamana i te whakamahinga haumanu o FAST-POCT, i whakamatauria e matou nga tauira haumanu 36 (tauira ihu ihu) mai i nga turoro IB (n=18) me nga mana whakahaere kore-IB (n=18) (Whakaahua 6a).Ko nga korero a te hunga mate e whakaatuhia ana i te Ripanga Taapiri 3. Ko te mana o te mate IB i whakapumautia motuhake, a, i whakaaetia te kawa ako e te Whare Wananga Tuatahi o te Whare Wananga o Zhejiang (Hangzhou, Zhejiang).I wehea ia tauira o nga turoro ki nga waahanga e rua.Ko tetahi i tukatukahia ma te whakamahi i te FAST-POCT, ko tetahi i tukatukahia ma te whakamahi i te punaha PCR papamahi (SLAN-96P, Haina).Ka whakamahia e nga whakamatautau e rua nga kete purenga me nga kete rapu.I te piki.6b e whakaatu ana i nga hua o te FAST-POCT me te PCR whakamuri whakamuri tikanga (RT-PCR).I whakatairitehia e matou te kaha o te rewharewha (FAST-POCT) me te -log2(Ct), ko te Ct te paepae huringa mo te RT-PCR tikanga.He pai te whakaaetanga i waenganui i nga tikanga e rua.Ko te FAST-POCT me te RT-PCR i whakaatu he hononga pai kaha me te uara o Pearson (r) 0.90 (Whakaahua 6b).Ka aromatawaihia e matou te tika o te tātaritanga o FAST-POCT.Ko nga tohatoha o te kaha o te fluorescence (FL) mo nga tauira pai me te kino i tukuna hei ine tātari motuhake (Fig. 6c).Ko nga uara FL i tino teitei ake i roto i nga turoro IB i nga mana whakahaere (****P = 3.31 × 10-19; whakamatautau-t-rua) (Fig. 6d).I muri mai, i whakatakotohia nga tohu whakahaere a te kaiwhiwhi IBV (ROC).I kitea e matou he tino pai te tika o te taatai, me te waahi i raro i te pihi o te 1 (Fig. 6e).Kia mahara mai na te ota kanohi kanohi i Haina na te COVID-19 mai i te tau 2020, kare ano matou i tohu i nga turoro me te IBD, no reira ko nga tauira haumanu pai katoa (arā, nga tauira o te nasal swab) mo IBV anake.
Te hoahoa rangahau haumanu.E 36 nga tauira, tae atu ki te 18 nga tauira turoro me te 18 nga mate rewharewha kore, i tātarihia ma te whakamahi i te papaaho FAST-POCT me te RT-PCR tikanga.b Aromatawai i te riterite tātaritanga i waenga i te FAST-POCT PCR me te RT-PCR tikanga.He pai te hono o nga hua (Pearson r = 0.90).c Korerekereke taumata kaha i roto i 18 tūroro IB me 18 mana.d I roto i nga turoro IB (+), he nui ake nga uara FL i te roopu whakahaere (-) (****P = 3.31 × 10-19; whakamatautau-t-rua; n = 36).Mo ia papa tapawha, ko te tohu pango kei waenganui ko te tau waenga, ko nga rarangi o raro me o runga o te pouaka e tohu ana i te 25 me te 75 o te ōrau.Ka toro atu nga paihikete ki te iti me te morahi o nga tohu raraunga, kaore e kiia he mea kee.e ROC ānau.Ko te raina iraira d e tohu ana i te uara paepae i whakatauhia mai i te tātaritanga ROC.Ko te AUC mo te IBV he 1. Ka whakaratohia nga raraunga mata hei konae raraunga mata.
I roto i tenei tuhinga, ka whakaatuhia e matou te FAST, kei a ia nga ahuatanga e hiahiatia ana mo te POCT pai.Ko nga painga o a maatau hangarau ko: (1) Ko te horopeta maha (cascade, te wa kotahi, te raupapa me te whiriwhiri), te tuku i runga i te tono (te tuku tere me te riterite o te pehanga tono) me te mahi pono (te wiri i te 150 nga nekehanga) (2) te rokiroki mo te wa roa (2 tau o te whakamatautau tere, te mate taimaha mo te 0.3%);(3) te kaha ki te mahi me nga wai me te whanuitanga o te makuku me te viscosity (viscosity ki te 5500 cP);(4) Ohaoha (Ko te utu rauemi mo te taputapu FAST-POCT PCR he tata ki te US$1).Na roto i te whakakotahitanga o nga kaitoha maha, i whakaatuhia he papaa FAST-POCT mo te kitenga PCR o nga huaketo rewharewha A me B i whakaatuhia me te tono.FAST-POCT 82 meneti noa iho.Ko nga whakamatautau haumanu me nga tauira 36 nasal swab i whakaatu i te pai o te whakakotahitanga i roto i te kaha o te fluorescence me te RT-PCR paerewa (pearson coefficients > 0.9).Ko nga whakamatautau haumanu me nga tauira 36 nasal swab i whakaatu i te pai o te whakakotahitanga i roto i te kaha o te fluorescence me te RT-PCR paerewa (pearson coefficients > 0.9).Клинические тесты с 36 образцами мазков из носа показали хорошее соответвие интенсивности флуоресценциТТТА иенты Пирсона > 0,9).Ko nga whakamatautau haumanu me nga tauira 36 o te nasal swabs i whakaatu i te pai o te whakaae ki te kaha o te rewharewha o te RT-PCR paerewa (pearson's coefficients > 0.9).RT-PCR Клинические испытания 36 образцов мазков из носа показали хорошее совпадение интенсивности флуоресценцни Россия ициент Пирсона > 0,9).Ko nga whakamatautau haumanu o nga tauira 36 nasal swab i whakaatu i te pai o te whakaae o te kaha o te rewharewha me te RT-PCR paerewa (te whakarea o Pearson > 0.9).I te whakarara ki tenei mahi, he maha nga momo tikanga matū koiora ka puta ake (hei tauira, te paihikara waiariki plasma, te whakakaha-kore immunoassays, me nga whakamatautau mahi nanobody) kua whakaatu i to raatau kaha ki te POCT.Heoi, na te kore o te papaahi POCT tino whakakotahi me te pakari, kare e kore e tika kia wehea enei tikanga i mua i te tukatuka (hei tauira, te wehenga RNA44, te incubation45 me te horoi46), e whakakii ana i nga mahi o naianei me enei tikanga ki te whakatinana i nga mahi POCT matatau me nga tawhā e hiahiatia ana.mahi tiki-i-whakautu-putanga.I roto i tenei mahi, ahakoa he iti noa te papu o te hau e whakamahia ana ki te whakahohe i te valve FAST ki te whakauru ki roto i te taputapu benchtop (Fig. S9, S10), ka pau tonu te mana nui me te whakaputa haruru.Ko te tikanga, ka taea te whakakapi i nga papua pneumatic ahua iti ake e etahi atu tikanga, penei i te whakamahi i te mana hiko, i te mahi maihao ranei.Ko etahi atu whakapainga ka uru pea, hei tauira, te urutau kete mo nga momo whakamatautau koiora motuhake, ma te whakamahi i nga tikanga rapunga hou kaore e hiahiatia he punaha whakamahana/matao, na reira ka whakarato i tetahi papaahi POCT kore taputapu mo nga tono PCR.E whakapono ana matou na te mea ko te papaa FAST he huarahi ki te raweke i nga wai, e whakapono ana matou ko te hangarau FAST e whakaarohia ana ka taea te hanga i tetahi papaa noa ehara i te mea mo te whakamatautau koiora, engari mo te tirotiro i te taiao, te whakamatautau kounga kai, te rauemi me te whakahiato raau taero. ..
Ko te kohinga me te whakamahi i nga tauira o te nasal swab tangata kua whakaaetia e te Komiti Matatika o te Whare Wananga Tuatahi o Zhejiang University Affiliated Hospital (IIT20220330B).E 36 nga tauira kaukau ihu i kohia, 16 nga pakeke <30 tau, 7 pakeke> 40 tau, 19 nga tane, 17 nga wahine.E 36 nga tauira kaukau ihu i kohia, 16 nga pakeke <30 tau, 7 pakeke> 40 tau, 19 nga tane, 17 nga wahine.Было собрано 36 образцов мазков из носа, в которых приняли участие 16 взрослых < 30 лет, 7 взрослых 40 стар енщин.Toru tekau ma ono nga tauira kaukau ihu i kohia mai i nga pakeke 16 <30 tau, 7 nga pakeke neke atu i te 40 tau, 19 nga tane me nga wahine 17.Ko nga raraunga taupori ka whakaatuhia ki te Ripanga Tāpiri 3. I whiwhi whakaaetanga mai i nga kaiuru katoa.Ko nga kaiuru katoa i whakapaehia he rewharewha, a, i whakamatauria marietia kaore he utu.
Ko te turanga me te taupoki FAST he mea hanga ki te waikawa polylactic (PLA) ka taia e Ender 3 Pro 3D pūreretā (Shenzhen Transcend 3D Technology Co., Ltd.).I hokona mai te riipene taha-rua mai i Adhesives Research, Inc. Tauira 90880. I hokona mai te kiriata PET 100 µm te matotoru mai i a McMaster-Carr.I tapahia te whakapiri me te kiriata PET ma te whakamahi i te kaitapahi Silhouette Cameo 2 mai i te Silhouette America, Inc. He mea hanga te kiriata rapa mai i te rauemi PDMS ma te werohanga.Tuatahi, ka tapahia he anga PET 200 µm te matotoru ma te whakamahi i te punaha laser, ka whakapiri ki te pepa PMMA 3 mm te matotoru ma te whakamahi i te riipene whakapiri taha-rua 100 µm.Ko te PDMS precursor (Sylgard 184; Wāhanga A: Wāhanga B = 10:1, Dow Corning) ka ringihia ki roto i te pokepokea ai ka whakamahia he rakau karaihe hei tango i te taikaha o te PDMS.I muri i te rongoa i te 70 ° C. mo nga haora 3, ka taea te tihorea te kiriata PDMS 300 μm matotoru i te pokepokea ai.
Ko nga whakaahua mo te tohatoha whanui, te whakaputa i runga i te tono me te mahi pono ka tangohia me te kamera tere-tere (Sony AX700 1000 fps).Ko te wiri orbital i whakamahia i roto i te whakamatautau pono i hokona mai i SCILOGEX (SCI-O180).Ko te pehanga hau he mea hanga e te hau compressor, a he maha nga kaiwhakarite pehanga tohu mamati e whakamahia ana hei whakatika i te uara pehanga.Ko te tukanga whakamatautau whanonga rere e whai ake nei.I werohia te nui o te wai ki roto i te taputapu whakamatautau ka whakamahia he kamera tere tere ki te tuhi i te whanonga rere.Na ka tangohia nga whakaahua mai i nga riipene whakaata o te rere i nga waa kua whakaritea, a ko te toenga o te horahanga i tatauhia ma te whakamahi i te rorohiko Image-Pro Plus, ka whakareatia ki te hohonutanga o te kamera hei tatau i te rōrahi.Ko nga korero mo te punaha whakamatautau whanonga rere ka kitea i te Whakaaturanga Tāpiri S4.
Me werohia te 50 µl o te microbeads me te 100 µl o te wai whakaheke ki roto i te taputapu whakaranu.I tangohia nga whakaahua mahi ranu ki te kamera tere teitei ia 0.1 hēkona i te pehanga 0.1 pae, 0.15 pae me te 0.2 pae.Ko nga korero pika i te wa o te whakakotahitanga ka taea te tiki mai i enei whakaahua ma te whakamahi i te rorohiko tukatuka whakaahua (Photoshop CS6).A ka taea te whakakotahi i te pai ki te Whakatau 53 e whai ake nei.
ko te M ko te pai o te whakaranu, ko te N te tapeke o nga tauira pika, a ko te ci me te \(\bar{c}\) ko nga kuhanga kua whakaritea me te tumanako.Mai i te 0 (0%, kaore i konatunatua) ki te 1 (100%, kua oti te whakauru).Ko nga hua e whakaatuhia ana i te Whakaaturanga Tāpiri S6.
Ko te kete RT-PCR mo te IAV me te IBV, tae atu ki nga tauira IAV me IBV RNA (cat. No. RR-0051-02 / RR-0052-02, Liferiver, Haina), Tris-EDTA buffer (TE buffer no. B541019 , Sangon Biotech, Haina), Positive Control RNA Purification Kit (Wahanga No. Z-ME-0010, Liferiver, Haina) me te GAPDH Solution (Wahanga Nama M591101, Sangon Biotech, Haina) kei te hokohoko.Kei roto i te kete purenga RNA he parepare herea, horoi A, horoi W, eluent, microbeads autō, me te kawe kiriaku.Kei roto i nga kete RT-PCR IAV me IBV wa-tūturu ko te IFVA nucleic acid PCR detection mix me te RT-PCR enzyme.Taapirihia te 6 µl o AcrylCarrier me te 20 µl o nga pirepire aukume ki te 500 µl o te wairewa parepare here, ruru pai katahi ka whakarite i te otinga pirepire.Taapirihia te 21 ml o te waihano ki te horoi i te A me te W, ruru pai kia whiwhi wairewa o te horoi A me te W.Na, 18 µl o te ranunga PCR fluorescent me te IFVA nucleic acid me te 1 µl o RT-PCR enzyme i tapirihia ki te 1 µl o te otinga TE, ka ruia, ka centrifuge mo etahi hēkona, ka whiwhi 20 µl o IAV me IBV tuatahi.
A pee i te tukanga purenga RNA e whai ake nei: (1) RNA adsorption.Pipetohia te 526 µl o te wairewa pire ki roto i te ngongo centrifuge 1.5 ml ka tapirihia te 150 µl o te tauira, ka ruia a ringa te ngongo ki runga me raro kia 10 nga wa.Whakawhitihia te 676 µl o te ranunga ki te pou hononga me te centrifuge i te 1.88 x 104 g mo te 60 hēkona.Ka rukea nga awaawa o muri mai.(2) Te wahanga tuatahi o te horoi.Tāpirihia te 500 µl o te wairewa horoi A ki te tīwae affinity, centrifuge i te 1.88 x 104 g mo te 40 hēkona, ka makahia te otinga pau.I tuaruatia te mahi horoi nei.(3) te wahanga tuarua o te horoi.Tāpirihia te 500 µl o te wairewa horoi W ki te tīwae affinity, centrifuge i te 1.88×104 g mō te 15 hēkona, ka makahia te otinga pau.I tuaruatia te mahi horoi nei.(4) Elution.Tāpirihia te 200 µl o te eluate ki te tīwae affinity me te centrifuge i te 1.88 x 104 g mo te 2 min.(5) RT-PCR: I werohia te eluate ki roto i te 20 μl o te wairewa tuatahi i roto i te ngongo PCR, katahi ka tukuna te ngongo ki roto i te taputapu whakamatautau PCR (SLAN-96P) hei whakahaere i te mahi RT-PCR.Tata ki te 140 meneti te katoa o te mahi rapu (20 meneti mo te purenga RNA me te 120 meneti mo te rapu PCR).
526 µl o te wairewa pirepire, 1000 µl o te wairewa horoi A, 1000 µl o te wairewa horoi W, 200 µl o te eluate me te 20 µl o te wairewa tuatahi i whakaurua tuatahitia, ka rongoatia ki roto i nga ruma M, W1, W2, E me nga ruma kimi PCR.Huihuinga papa.I muri iho, 150 µl o te tauira i paipa ki roto i te ruma M ka kuhuhia te turanga FAST-POCT ki roto i te taputapu whakamatautau e whakaatuhia ana i te Whakaaturanga Tāpiri S9.I muri tata ki te 82 meneti, kua waatea nga hua whakamatautau.
Ki te kore e tohuhia, ko nga hua whakamatautau katoa ka whakaatuhia ko te tikanga ± SD i muri i te iti rawa o nga tauira e ono ma te whakamahi i te papanga FAST-POCT anake me nga tauira motuhake koiora.Kaore he raraunga i whakakorehia mai i te tātaritanga.Ko nga whakamatautau ehara i te mea ohorere.Kaore nga kairangahau i matapo ki nga mahi a te roopu i te wa o te whakamatautau.
Mo te roanga atu o nga korero mo te hoahoa ako, tirohia te Ripoata Rangahau Taiao e hono ana ki tenei tuhinga.
Ko nga raraunga e tautoko ana i nga hua o tenei rangahau e waatea ana i roto i nga korero taapiri.Ka whakaratohia e tenei tuhinga nga raraunga taketake.
Chagla, Z. & Madhukar, P. Ko nga kaiwhakatairanga COVID-19 i roto i nga whenua whai rawa ka whakaroa i nga kano kano mo te katoa.Chagla, Z. & Madhukar, P. Ko nga kaiwhakatairanga COVID-19 i roto i nga whenua whai rawa ka whakaroa i nga kano kano mo te katoa.Chagla, Z. me Madhukar, P. Ko nga kaiwhakatairanga COVID-19 i nga whenua whai rawa ka whakaroa i nga kano kano mo te katoa.Chagla, Z. and Madhukar, P. COVID-19 revaccination i roto i nga whenua whai rawa ka whakaroa te werohanga mo te katoa.Te rongoa a motu.27, 1659–1665 (2021).
Faust, L. et al.Ko te whakamatautau SARS-CoV-2 i nga whenua iti-me waenga-moni: te waatea me te utu i roto i te waahanga hauora motuhake.mate moroiti.22, 511–514 (2020).
Whakahaere Hauora o te Ao.Te nui o te ao me te pa o nga mate kua tohua ka taea te rongoa: he arotake me te whakatau tata.Geneva: WHO, WHO/HIV_AIDS/2 https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/66818/WHO_HIV_AIDS_2001.02.pdf (2001).
Fenton, EM et al.He maha nga waahanga whakamatautau rerenga taha 2D kua whakarewahia.tono ASS.alma mater.Inter Milan.1, 124–129 (2009).
Schilling, KM et al.He taputapu tātari pepa-microfluidic kua kapi katoa.nono.Te matū.84, 1579–1585 (2012).
Lapenter, N. et al.Ko te immunochromatography i runga i te pepa whakataetae me nga electrodes kua whakarerekehia e te enzyme ka taea te aroturuki ahokore me te whakatau hiko o te cotinine mimi.Pūoko 21, 1659 (2021).
Zhu, X. et al.Te ine i nga tohu koiora mate me te papaa wai whakahiato kua whakauruhia ki te nanozyme ma te whakamahi i te glucometer.pūoko koiora.Koiorahiko.126, 690–696 (2019).
Boo, S. et al.Ko te tarai whakamatautau mo te wa hapu mo te kite i nga huakita pathogenic ma te whakamahi i te concanavalin A-tangata chorionic gonadotropin-Cu3(PO4)2 hybrids nanoflowers, te wehenga autō me te panui waea atamai.Rorohikohiko.Moheni.185, 464 (2018).